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基础医学
> 10代大鼠肝干细胞表面标志物的免疫荧光鉴定
10代大鼠肝干细胞表面标志物的免疫荧光鉴定
图片来源:
王亚萍,佟明华,雷香丽,孔祥平,罗显荣.
一种改进的大鼠胎肝干细胞分离纯化方法 ,
第三军医大学学报, 2013 (04).
>>查看本文图片摘要
图片关键词:
表面标志
免疫荧光
干细胞
肝干细胞
所属学科:
基础医学
图片上下文:
滴加在实验标本上,待完全覆盖标本60s后,用PBS将其从标本上冲洗干净,然后将标本浸入饱和Na2HPO4溶液中2min,待标本颜色变蓝后即可洗涤,然后取出标本封片,观察。2结果2.1肝干细胞存活率及形态特征台盼蓝染色证实分离的细胞存活率为90%。镜下见分离的肝干细胞大小均匀,呈鹅
....
卵石形态(图1A)。接种培养瓶24h细胞开始贴壁并伸展(图1B);培养3d后细胞体积增大,呈梭形或多角形(图1C)。经1~2次差异性消化传代后,即可得到较纯的肝干细胞,细胞呈集落样生长,边缘清晰且折光率强(图1D)。2.2肝干细胞的免疫荧光化学技术检测结果P1代细胞C-Kit、AFP、OV6、CK19呈阳性表达(图2A~D),Alb表达呈阴性,图F为与图E同一视野下DAPI核染结果。2.3免疫细胞化学(辣根过氧化物酶法)检测P10代肝干细胞表面标志细胞CD34、C-Kit、OV6、CK19呈阳性表达。见图3。3讨论肝干细胞是肝组织中存在的一类具有自我复制和分化能力的细胞,在肝脏疾病治疗中具有较大的应用前景。正常情况下,体内肝干细胞多处于静息期,数量ABCDA:新分离时;B:培养24h后;C:培养3d后;D:第1次差异性消化后图1不同原代培养时间的肝干细胞形态学变化(双相倒置显微镜×200)ABCDEFA~D:分别为P1代大鼠肝干细胞表面标志物C-Kit、AFP、OV6、CK19的免疫荧光鉴定(×400);E:Alb(×100),F:图E同一视野下DAPI核染结果(×100)图2肝干细胞免疫荧光细胞化学染色观察ABCD200μm50μm50μm50μmA:CD34;B:C-Kit;C:OV6;D:CK19图3P10代大鼠肝干细胞表面标志物的免疫荧光鉴定367第35卷第4期2013年2月28日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol.35,No.4Feb.282013
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