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生物学
> 转基因拟南芥种子萌发2周的照片
转基因拟南芥种子萌发2周的照片
图片来源:
刘慧娟,冯志国,李先文,李涛,何光源.
采用农杆菌花序浸染法获得转crtB基因拟南芥 ,
湖北农业科学, 2013 (01).
>>查看本文图片摘要
图片关键词:
照片
转基因拟南芥
种子萌发
照片
所属学科:
生物学
图片上下文:
析2.1转基因拟南芥的获取与检测结果通过农杆菌花序浸染法转化野生型拟南芥Columbia,将T0代转化植株在含20mg/L潮霉素的培养基上筛选(图3),得到14个转基因株系,PCR扩增并进行琼脂糖凝胶电泳检测,发现这14个转基因株系中均能检测出片段大小约为800bp的目标片段,与
....
tp-crtB基因的预期大小相符(图4),说明crtB基因已成功转入拟南芥中。2.2转基因拟南芥种子的萌发和植株发育取得到的转基因拟南芥F1代种子进行萌发实验。在长日照条件(16h/d)下培养2周,转基因植株与野生型相比没有表型上的差异(图5),证明转入crtB基因并没有影响到拟南芥种子的发育过程。3小结与讨论植物表达载体pBI121从根瘤农杆菌双元质粒pBNI19衍生而来,为组成型表达载体,大小为14kb,多克隆位点上游带有CaMV(花椰菜花叶病毒)35S启动子,下游带有GUS报告基因,还带有可进行潮霉素抗性筛选的NPTⅡ基因。CaMV35S启动子是用于植物重组基因表达效果较好的组成型启动子,发育阶段或组织特异性调控对转录时间、地点和水平的高低都没有影响[3,6]。由于本研究需要crtB基因在拟南芥种子中特异性地表达,所以采用油菜种子特异性启动子napA[7]替代了CaMV35S启动子。本实验将β-胡萝卜素合成基因crtB置于导肽基因tp下游,可以使该基因表达产物进入植物质体。从目前实验的进展来看,该基因的导入并没有影响种子的萌发。可以推测,crtB基因在拟南芥中的过量表达可能会影响其类胡萝卜素含量和成分的分配,这还有待于进一步的研究。参考文献:[1]SCHWARTZSH,QINX,ZEEVAARTJAD.Elucidationoftheindirectpathwayofabscisicacidbiosynthesisbymutants,genes,andenzymes[J].PlantPhysiology,2003,131(4):1591-160
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