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水产和渔业
> 经不同浓度戊二醛固定20min的病毒粒子的透射电镜分析
经不同浓度戊二醛固定20min的病毒粒子的透射电镜分析
图片来源:
邬君君,谷力,李钫.
对虾白斑综合症病毒透射电镜分析中病毒固定条件的优化 ,
应用海洋学学报, 2013 (02).
>>查看本文图片摘要
图片关键词:
病毒粒子
透射电镜分析
戊二醛
所属学科:
水产和渔业
图片上下文:
2期邬君君,等:对虾白斑综合症病毒透射电镜分析中病毒固定条件的优化·285·其次,本研究分析了不同浓度的戊二醛对WSSV粒子固定的情况.结果显示,相对没有固定的病毒粒子(图2a)而言,低浓度(0.25%)的戊二醛能使大部分病毒粒子保持完整形态,但仍有少数病毒粒子出现轻微的脱膜(图
....
2b).随着戊二醛浓度的增加(0.50%~2.00%),病毒的结构也越来越致密,但是由于戊二醛的交联作用比较强,会导致病毒粒子吸附重叠、染色不均匀(图2c和2d),部分病毒粒子的形态结构发生变化.戊二醛的浓度越高(2.00%),病毒粘附在一起的现象越明显,甚至会出现大面积聚集致使电镜光束无法透过(图2e),不利于电镜观察.图2经不同浓度戊二醛固定20min的病毒粒子的透射电镜分析Fig.2TEManalysisofvirionsfixedwithdifferentconcentrationsglutaraldehydefor20minutesa.没有固定的病毒粒子,b.经0.25%戊二醛固定20min后的病毒粒子,c.经0.50%戊二醛固定20min后的病毒粒子,d.经1.00%戊二醛固定20min后的病毒粒子,e.经2.00%戊二醛固定20min后的病毒粒子综上所述:我们认为多聚甲醛比戊二醛更适合作为WSSV病毒粒子的固定剂,而且1.00%的多聚甲醛固定效果最适.2.21.00%多聚甲醛对病毒粒子固定5d和30d后的效果分析为了进一步了解病毒粒子能否在固定液中保存,我们观察了在1.00%的多聚甲醛固定液中4℃保存了5d和30d的样品.电镜结果显示(图3),在固定液中保存了5d和30d的病毒粒子仍然保持了较好的完整,囊膜和核衣壳比较致密(图3b和3c),而未经固定病毒粒子出现了明显的解体(图3a).2.3固定的病毒粒子进行金标免疫电镜金标免疫电镜是研究病毒结构的重要手段之一[9],而醛类固定液的作用机理是形成分子间的交联,交联形成的网格结构可能部?
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