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林业
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PtrWND1BP启动子及缺失序列在烟草叶片内瞬时表达
图片来源:
黄婷,徐刚标.
毛果杨WND1B基因启动子的克隆与缺失初步分析 ,
中南林业科技大学学报, 2012 (04).
>>查看本文图片摘要
图片关键词:
序列
瞬时表达
烟草叶片
启动子
缺失
序列
所属学科:
林业
图片上下文:
oflowtemperatureresponsiveelement(LTRE)等,以及其他一些重要元件。此外可能的转录起始位点位于PtrWND1B基因起始密码子上游132个bp处。2.4瞬时表达分析经GUS染色、乙醇充分脱色后,PtrWND1BP-F3和PtrWND1BP-F4序
....
列瞬时表达的叶片可被染色,说明它们能启动Gus基因的表达,具有启动基因转录的普遍性。而PtrWND1BP-F2序列无法启动Gus基因的表达(见图6)。3讨论本研究根据GenBank数据库获得的图51301POG-1BP构造示意图Fig.5Diagramof1301POG-1BP(从左到右依次为:PtrWND1BP、PtrWND1BP-F2/F3、PtrWND1BP-F4)图6PtrWND1BP启动子及缺失序列在烟草叶片内瞬时表达Fig.6TransientexpressionofPtrWND1BPandtruncatedsequencesintabaccoPtrWND1B的基因组序列进行BLAST分析得到启动子序列,通过克垄转化、测序一系列实验步骤得到PtrWND1BP和4个部分缺失序列PtrWND1BP-F2/F3/F4/F5,进行酶切验证和测序比对后确认获得了目的序列。对PtrWND1BP进行的生物信息学分析表明,该序列符合真核生物细胞启动子的明显特征,具有典型的核心启动子区域和一些预测的顺式作用元件。将PtrWND1BP和PtrWND1BP-F2/F3/F4/F5在烟草叶片中进行瞬时表达。对转化的叶片进行GUS组织化学染色,发现克隆的PtrWND1BP、PtrWND1BP-F3和PtrWND1BP-F4序列可以激活Gus基因的表达,具有启动基因转录的普遍性,其中PtrWND1BP-F3序列是目前已知的具有PtrWND1BP的启动子活性的最短序列。而PtrWND1BP-F2序列无法激活Gus基因的表达。PtrWND1BP-F2来自PtrWND1BP序列对PtrWND1B5’非编码区序列(5'UntranslatedRegions,5'UTR)的缺失。一般认为,真核生物的mRNA5'UTR包含一些调控元件,通过与阻遏物的结合来调控mRNA的翻译[10]。目前的研究表明,真核生物mRNA5
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