• 图片出处
文献标题: 1.man2c1基因表达抑制经有丝分裂阻滞及凋亡诱导抑制食管癌细胞生长 2.8B7血影蛋白的细胞内定位
文献来源: 田云  中国协和医科大学  2008年
文献关键词: Man2c1食管癌RNAi恶性生物学行为有丝分裂凋亡8B7血影蛋白Nesprin蛋白家族
文献摘要: 本论文的第一部分是Man2c1基因表达抑制经有丝分裂阻滞及凋亡诱导抑制食管癌细胞生长。 本实验室于2000年克隆到了人α-甘露糖苷酶Man2c1 cDNA,GenBank登记号为AF044414,此cDNA长3123 bp,编码产生的α-甘露糖苷酶长1040 aa,分子量在去糖基化状态下为116 kDa。鞠吉雨师兄用腺病毒介导的RNAi技术抑制Man2c1基因在人食道癌细胞株EC9706的表达,得到两株Man2c1基因表达显著抑制的EC9706细胞(B7和D2)。我们研究发现,B7和D2细胞在体外培养中的生长和集落形成明显抑制,它们接种裸鼠皮下的成瘤性生长明显减慢。流式细胞仪分析见细胞在S和G2/M期聚集,并出现sub-G_0/G_1峰,提示细胞发生凋亡。 我对此现象的机制进行了探讨。我首先分析了细胞的有丝分裂状况,见与对照细胞相比,B7和D2细胞的有丝分裂阻滞于M检验点。由于真核细胞的很多重要功能如细胞分裂均依赖细胞骨架,我用抗α-tubulin单抗免疫荧光染色细胞骨架,显示B7和D2细胞的微管结构变得模糊,并且在核周聚集,有些细胞还有长的胞质性突起。用抗α-tubulin单抗作Western印迹检测,见B7和D2细胞中聚合的α-tubulin减少。这些数据显示,Man2c1抑制导致EC9706细胞恶性生物学行为减弱的可能机制之一是,α-tubulin聚合受阻,影响微管重排,导致细胞有丝分裂?
全文图片
  • 正在努力加载………
    加载完成