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文献标题: 茶花CjAPL1基因干扰表达载体的构建与遗传转化
文献来源: 孙迎坤;李纪元;殷恒福;  青岛农业大学学报(自然科学版)  2013年  02期
文献关键词: 茶花CjAPL1基因干扰表达载体构建遗传转化
文献摘要: 茶花CjAPL1基因是MADS-box基因家族的AP1同源基因,AP1基因对于植物花器官的发育具有重要调控功能。本实验选取CjAPL1基因中长度为292bp的基因干扰片段,采用双酶切方法构建了有反向重复序列的RNA干扰中间载体pUCC-CjAPL1。分别用Pst I单酶切pUCC-CjAPL1中间载体和pCAMBIA1300植物表达载体,将有反向重复序列的小片段与pCAMBIA1300大片段连接,得到最终植物干扰表达载体pCAMRNAi-CjAPL1。采用热激法转化农杆菌GV3101,花序浸染法转化野生型拟南芥植株。利用潮霉素筛选阳性植株,进一步进行PCR扩增验证和表型观察统计。结果表明,pCAMRNAi-CjAPL1表达载体构建完整,且干扰载体成功地导入拟南芥基因组中。转基因植株表现出雄蕊缺失1~2枚的花型变化,证明CjAPL1基因对于雄蕊等花器官的发育起到了调控作用。
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