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文献标题: 三角帆蚌肌球蛋白必需轻链基因(MELC)的cDNA全长克隆与表达分析
文献来源: 舒妙安;胡杭娇;陆晶莹;徐宾朋;王岩;刘广绪;郭晓令;  农业生物技术学报  2013年  07期
文献关键词: 三角帆蚌肌球蛋白必需轻链RACE实时荧光定量PCR组织表达
文献摘要: 肌球蛋白必需轻链基因是EF-hand钙结合蛋白家族的成员,具有很强的Ca2+结合活性。为了研究三角帆蚌钙代谢基因调控机制,本研究采用同源克隆策略和RACE技术,从三角帆蚌外套膜组织中成功克隆得到肌球蛋白必需轻链基因(myosin essential light chain,MELC)的全长cDNA序列,共1119bp,开放阅读框468bp(47~514),编码155个氨基酸,相对分子量为17.49kD,理论等电点为4.53,基因序列提交GenBank的登录号为JX275828。通过PROSITEtools软件预测显示三角帆蚌MELC基因有一对保守的EF-hand结构域,可结合Ca2+,属于EF-hand钙结合蛋白家族。同源性比对分析显示,三角帆蚌MELC基因与合浦珠母贝(Pinctada fucata)、太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、盘鲍(Haliotis discus discus)等海水贝类的MELC基因同源性最高,依次为69%、69%和68%。经实时荧光定量PCR检测,发现MELC基因在闭壳肌、外套膜、鳃、斧足、性腺、心脏、肝脏、肠等8个组织中均有表达,其中在外套膜、鳃和斧足等与贝类钙代谢相关的组织中表达量远高于肝脏、肠等消化器官,预示MELC基因可能参与三角帆蚌的钙代谢过程。不同Ca2+浓度处理实验的结果表明,随着水体中Ca2+浓度逐渐升高,三角帆蚌MELC基因在外套膜中的表达量呈先上调后下降的趋势,在60mg/L时达到最高值,表明适宜的
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