| 文献标题： |
细胞内转录拯救Asia1型口蹄疫病毒 |
| 文献来源： |
李平花;白兴文;卢曾军;孙普;郭建宏;李冬;曹伟军;陈应理;刘湘涛;殷宏;刘在新; 中国农业科学 2009年 02期 |
| 文献关键词： |
口蹄疫病毒感染性分子克隆病毒拯救T7RNA聚合酶 |
| 文献摘要： |
【目的】建立口蹄疫病毒(FMDV)感染性分子克隆的体内拯救技术平台,为深入研究该病毒基因组的结构与功能奠定基础。【方法】将置于T7启动子下的FMDVAsia1/JS/China/2005株全长cDNA的真核重组质粒pFMDV-A经NotI线化后和表达T7RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行病毒体内拯救的研究。【结果】转染细胞盲传第3代48h后出现致细胞病变(CPE),第4代10h出现典型的CPE。RT-PCR、间接免疫荧光、电镜等均检测到了拯救的FMDV,而且存在分子标签,表明构建的FMDV全长cDNA分子克隆在BHK-21细胞内成功包装出FMDV。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力(LD50)差异不显著,具有相似的生物学特征。共转染试验重复多次,均拯救到FMDV病毒。【结论】成功建立了基于质粒为基础的FMDV的体内拯救方法。 |